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利用多重激光微孔板细胞分析仪进行细胞增殖及细胞周期分析

发布时间:2016-11-17 阅读:0次

越来越多的研究人员希望通过高内涵分析从单个样品中获得多种信息,以减少经济和人力消耗的同时增加检测通量。目前这种多重检测的程度受限于可用的试剂----多数荧光探针的最佳激发波长大都在488nm附近,而这些荧光探针在光谱曲线上的重叠限制了它们在多通道分析上的应用。另一个限制是许多荧光检测系统的激发和检测范围仅限于一个狭窄的波长范围,导致它们不兼容某些荧光指示剂。如今,试剂和仪器的同步发展扩充了可用新产品的范围,因而使得以不同的光谱检测多种荧光探针成为可能,提升了多通道检测的能力。

激光扫描荧光微孔板细胞分析仪,Acumen eX3(TTP LabTech Ltd,UK),可在一台仪器中提供405nm,488nm和633nm三种波长的激发光,再加上每种激发光可获取四种荧光检测数据,大大扩展了可组合用于多色多重分析中的荧光试剂的范围,其激发波长范围与白光光源仪器相近。Acumen eX3将CCD成像仪强大的目标识别能力和快速的数据读取速度相结合,能够对96孔,384孔和1536孔板进行全孔高通量化高内涵分析,可达到24小时内获取30万个孔的数据这样的高通量。

荧光微孔板细胞分析仪在癌症研究中应用广泛,包括用碘化丙啶(PI)进行DNA染色(激发波长488nm)研究细胞增殖和细胞周期分析。在此我们通过在Acumen eX3上使用两种DNA染料Hoechst 34580(激发波长405nm),TO-PRO-3(激发波长633nm)进行分析,并探讨在免疫检测分析中的多通道技术的应用潜力。

结论:
• 不同激发波长(405nm,488nm和633nm)的细胞核染色所得的细胞数目显示良好的相关性 
• Hoechst 34580,TO-PRO-3和碘化丙啶(Propidium Iodide)可用于同一单孔中以进行多重分析 
• 利用Acumen eX3在405nm,488nm和633nm激发光可活细胞和固定后细胞都能进行细胞周期分析 
• 微孔板细胞分析仪非常适用于高通量化高内涵筛选,分析通量可达到每24小时超过30万孔,且无需担心数据储存问题。 



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